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Möglichkeit und Machbarkeit der Herstellung von Antikörpern mit Bakterien


Wie hier erwähnt, ist es möglich, Antikörperfragmente in Bakterien herzustellen und sie zu ernten (aus dem Medium, nehme ich an, aber ich habe keinen Zugriff auf den vollständigen Artikel). Wäre es möglich und machbar, aufgrund der Möglichkeit, Antikörper zu entwickeln, wichtige Antikörper in großem Maßstab durch Bakterien herzustellen, wie es beispielsweise mit Insulin geschieht?


Ich werde dies einleiten, indem ich sage, dass ich über Antikörper säugerlichen/menschlichen Ursprungs spreche, die aus zwei identischen schweren und zwei identischen leichten Ketten bestehen, die in die klassische Antikörperstruktur disulfidgebunden sind:

Es ist möglich, antikörperähnliche Moleküle herzustellen, die als Single-Chain-Antikörper bekannt sind, einschließlich Single-Chain Variable Fragments (scFv) in Bakterien und Viren, wo es auch als Phagen-Display bekannt ist. Diese Wirte können auch ein modifiziertes F . produzierenab Fragment, das als einzelne Polypeptidkette konstruiert wurde, und mehrere andere einkettige Antikörper-ähnliche Moleküle, wie unten gezeigt. Dies geschah in der Vergangenheit vor allem in E coli, da sie ein übliches Werkzeug zur Proteinexpression sind und im Allgemeinen als experimentelles System viele Vorteile haben. Die Produktion von Einzelketten-Antikörpern in E coli wird durch die Tatsache behindert, dass diese exogenen Proteine ​​dazu neigen, Einschlusskörper zu bilden, anstatt in das Medium sezerniert zu werden, wo sie viel leichter gesammelt und gereinigt werden können, ohne dass die Wirtszellen lysiert werden müssen. Das von Ihnen verlinkte Papier beschreibt eine Methode zur Herstellung von scFvs im Gram-positiven Bakterium Bacillus megaterium, das bei der Herstellung rekombinanter Proteine ​​immer häufiger vorkommt.

So ist es möglich, Antikörper-ähnliche Moleküle in Bakterien herzustellen. Im Gegensatz zu Insulin bestehen Antikörper voller Länge jedoch aus mehreren Polypeptidketten und sind sowohl glykosyliert als auch disulfidgebunden. Obwohl es Beweise dafür gibt, dass Bakterien diese beiden biochemischen Aufgaben erfüllen können, scheinen die Prozesse zusätzliche Chaperon-, Handels- und regulatorische Proteine ​​​​zu erfordern, die Bakterien nicht besitzen, und meines Wissens ist es den Wissenschaftlern bisher nicht gelungen, vollständige " richtigen" Antikörpermoleküle in Prokaryonten.

Es gibt jedoch viele Säuger/Mensch-Expressionssysteme zur Herstellung voll funktionsfähiger rekombinanter Antikörper in sehr hoher Ausbeute, und eine Reihe von FDA-zugelassenen monoklonalen Antikörper-Medikamenten sind jetzt auf dem Markt, viele weitere befinden sich in verschiedenen Entwicklungsstadien und klinischen Studien.


@MattDMo hat die Höhepunkte erreicht, aber ich wollte die Erstellung von Anbitodien-Bibliotheken für das Screening in Bacatera kommentieren. Aber das Interesse an Nanobodies ist aufgekommen – die Antikörper von Kameliden (Lamas und Kamele) haben nur eine Kette, was die Idee der heterologen Expression in Bakterien noch einfacher macht.